محلول رایت | محلول گیمسا

رنگ رایت گیمسا – محتویات رنگ رایت گیمسا – چگونگی عملکرد رنگ رایت گیمسا – ترکیب رنگ­های آزور B و ائوزین Y – تمایز بین هسته و سیتوپلاسم – محلول رایت گیمسا

ساختار و نوع عملکرد رنگ رایت گیمسا

به طور کلی به رنگ رایت گیمسا، رنگ­های رومانوفسکی (Romanowsky) نیز می­گویند که متشکل از رنگ­های اسیدی و بازی به منظور رنگ آمیزی ساختارهای درون سلول به رنگ­های مختلف و تشخیص آنها از یکدیگر می­­باشد. این رنگ در ساختار خود حاوی رنگ­های اسیدی ائوزین Y و، آزور B و متیلن بلو یا آبی متیلن، رنگ بازی می­باشند. اما رنگ رایت در ساختار خود علاوه بر رنگ­های فوق، متانول نیز دارد که نقش آن فیکس کنندگی است.

رنگ رایت گیمسا که امروزه در آزمایشگاه­های تشخیص طبی کاربرد گسترده­ای دارد که به طور خلاصه چگونگی عملکرد این رنگ بدین نحو است که از طریق ساختار اسیدی خود به اجزای بازی سلول­ها مانند سیتوپلاسم، گرانول­ها و غیره متصل می­شود و آنها را به رنگ قرمز در می­آورد و بخش بازی این رنگ نیز به ساختارهای اسیدی سلول مانند هسته متصل و آن را به رنگ بنفش در می­آورد.

دقت تشخیص رنگ رایت گیمسا

دقت تشخیص این رنگ به اندازه­ی کافی بالا هست تا بتوانید به مطالعه­ی انگل­هایی مانند لیشمانیا نیز بپردازید اما در صورت استفاده­ از نسبت­های نادرست، یا شستن ناکافی و غیره دقت آن به شدت پایین می­آید و نخواهید توانست رنگ آمیزی خوبی داشته باشید. در هر صورت با اینکه دقت کافی دارد اما وضوح خوبی نمی­توان از آن انتظار داشت.

رنگ رایت گیمسا برای تشخیص ساختارهای درون سلولی و مطالعه­ی سلول­های خونی

روش انجام

قبل از اینکه از محلول رایت گیمسا ابتدا باید گسترش خونی را تهیه کرد و اجازه دهیم نمونه بر روی لامل تمیز و استریل خشک شود سپس برای اینکه سلول فیکس شود و هیچ تغییری نکند به مدت ۵ دقیقه در متانول قرار می­دهیم (رنگ رایت، متانول در ساختار خود دارد و به این مرحله نیازی نیست). بافر فسفات را تهیه کرده و با تناسب صحیح آن را با این رنگ ترکیب کرده و گسترش خونی را تا حداکثر ۴ دقیقه داخل آن به حالت غوطه ور می­­گذاریم.

سپس لامل حاوی نمونه­ی خونی را با بافر فسفات تا ۳ بار شستشو می­دهیم و اجازه می­دهیم کاملا خشک شود. اکنون آماده­ی بررسی توسط میکروسکوپ می­باشد.

محدودیت روش انجام

از جمله محدودیت­های روش انجام رنگ رایت گیمسا این است که در صورت تهیه­ی گسترش ضخیم یا افزایش بیش از حد زمان رنگ آمیزی و یا شستن کم یا خیلی زیاد، اسیدی بودن بیش از حد بافر و غیره محدودیت عملکرد و کاربردی ایجاد می­کند. به همین دلیل در روش انجام محدودیت­های خاصی وجود دارد که روش انجام آن را مشکل ساز می­کند.

چگونگی تمایز بین هسته و سیتوپلاسم

نحوه­ی تمایزی که بین هسته و سیتوپلاسم توسط رنگ رایت گیمسا انجام می­شود در واقع نحوه­ی عملکرد آن را توضیح می­دهد. ساختارهای اسیدی سلول مانند هسته و هر جایی که در آن DNA و یا RNA قرار داشته باشد مانند پروتئین­های هسته­ی سلول و ریبوزوم با رنگ بازی متیلن بلو رنگ می­گیرند و به همین دلیل به آنها ساختارهای بازوفیل گویند. و قسمت بازی سلول مانند سیتوپلاسم نیز با رنگ اسیدی ائوزین Y و آزور B رنگ می­شوند و بنابراین به این ساختارها اسیدوفیل گویند. ساختارهای بازی به رنگ قرمز و ساختارهای اسیدی بنفش رنگ می­شوند و اینگونه می­توان بین هسته و سیتوپلاسم تمایز قائل شد.

محتویات رنگ رایت گیمسا

رنگ رایت گیمسا دارای ترکیبات زیر به عنوان محتوای تشکیل دهنده می­باشد. نکته­ی مهم این است که مقدار هر یک بر حسب میلی لیتر و یا گرم نوشته نشده است چرا که میزان رقّت و نسبت­ها بسته به نوع نمونه به صورت تجربی بدست می­آیند:

• پودر گیمسا و رایت
• متانول خالص و عاری از استون
• گلیسیرین
• بافر فسفات

ترکیب رنگ­های آزور B و ائوزین Y

امروزه از رنگ­های آزور B یا تری متیل تیونین به عنوان رنگ بازی استفاده می­کنند و از ائوزین Y به عنوان رنگ اسیدی استفاده می­شود. از این رنگ­ها به ترتیب برای افتراق ساختارهای درون سلولی هسته و سیتوپلاسم از طریق ایجاد رنگ­های متفاوت بهره می­گیرند. ترکیب این رنگ­ها را به جز رنگ رایت گیمسا، در رنگ­های جنر – گیمسا، می گرانوالد – گیمسا، لیشمن و غیره نیز بکار می­برند.

رنگ رایت گیمسا، جهت تشخیص افتراقی دقیق ساختارهای سلولی همراه با برخی محدودیت­ها

همانطور که مشاهده کردید رنگ رایت گیمسا از جمله رنگ­های مورد استفاده در هماتولوژی است که برای رنگ کردن ساختارهای درون سلولی و تشخیص­های بالینی استفاده می­گردد که دقت آن منوط به انجام دقیق این روش و میزان محدودیت­ها می­باشد.

منابع:

• http://www.labset.ir/news/501
• https://ttalab.ir/product/%D8%B1%D9%86%DA%AF-%D8%B1%D8%A7%DB%8C%D8%AA-%DA%AF%DB%8C%D9%85%D8%B3%D8%A7/
• http://biolabland.ir/protocol-wright-giemsa-stain-procedure/
• http://www.labset.ir/product-details/504
• https://biomavad.com/%D8%AA%DA%A9%D9%86%DB%8C%DA%A9-%D9%87%D8%A7/%D8%B1%D9%86%DA%AF-%D8%A2%D9%85%DB%8C%D8%B2%DB%8C-%DA%AF%DB%8C%D9%85%D8%B3%D8%A7/
• https://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticprocedures/blood/staining.html
• https://microbeonline.com/giemsa-stain-principle-procedure-and-results/

شرکت اوج آزما پلاست با ارائه انواع محلول رنگ رایت گیمسا و محلول رایت گیمسا از کمپانی های معتبراز قبیل بهارافشان، ارج، درمان کاو ،فن آوری روز آزمون آماده خدمت رسانی به شما آزمایشگاهیان عزیز می باشد.

جهت کسب اطلاعات بیشتر و خرید با ما تماس بگیرید (اینجا کلیک کنید).